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“先前提到,活菌表面有荚膜多糖,抗原表位被遮蔽。
“实际上更具体一点,嗜沫凝聚杆菌外膜蛋白a,正是通过二硫键与荚膜多糖交联,遮蔽下方的脂多糖表位。
“也就是说遮蔽抗原表位的,其实就是膜蛋白复合物,而这些蛋白就通过二硫键维持空间结构的稳定。”
完整二硫键维持的天然构象,会阻止抗体Fab段接近抗原表位。
因而,才根本没法生结合。
此时众人脸上都露出惊色。
不少人都不由得感慨。
埃米尔更是觉得羞愧万分。
亏他自己还是所谓的国际教授……
自己听完许秋的猜想之后,竟然打算直接用热灭活菌液直接做实验……
这也能成功。
但,效果和许秋如今的处理手法,却千差万别!
毕竟,热灭活,只能杀死表面的荚膜多糖。
而二硫键却还是会阻碍结合。
“不只是如此!”
这时候,段善继开口。
作为神经免疫学专家的他,看到了更多的东西。
他带着惊叹开口,道:“单纯做热灭活,后续要进行物理裂解,很有可能因为剧烈破碎破坏抗原表位,导致能生结合的抗原表位减少……
“但许秋的做法,热灭活属于物理处理、b-巯基乙醇的则是化学还原……物化协同,反应温和,可以保留生反应的脂多糖构象,从而确保抗体识别天然表位!”
若是要给个更精确的数据的话……
埃米尔的做法,d值可能只有.5左右,而许秋的做法,能将关键表位暴露提升信号1倍以上!
但凡有一点能结合的抗原表位,都不会遗漏!
可以说,堪称完美实验了。
“的确如此……”埃米尔思索过后,郑重点头。
再看向许秋的目光,越的复杂了。
而此刻,其余人也是极为专注,继续关注着许秋接下来的动作。
……
热灭活菌液制备完毕后,许秋将其与等体积的包被缓冲液混合。
随后离心,去除不溶性碎片,取上清用于eLIsa包被……
最终,到了最关键的一步——
。
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